DENGUE estudian duplicacion de virus

El virus del dengue (DENV) infecta 50-100 million personas en el mundo por año, causando graves problemas de salud pública. RNA polimerasa RNA-dependiente DENV, un objetivo atractivo para el desarrollo de fármacos, cataliza la replicación de novo del genoma viral en tres fases: iniciación, transición y elongación. El objetivo de este trabajo fue caracterizar el mecanismo de adición de nucleótidos catalizada por el dominio de la polimerasa del serotipo DEN 2, durante la elongación utilizando métodos cinéticos transitoria. Se midió la cinética de formación del complejo de elongación que contiene la polimerasa y el ARN de doble cadena mediante experimentos de preincubación. El conjunto complejo de elongación es lento, a raíz de un mecanismo vinculante de un solo paso con una tasa de asociación de 0,0016 ± 0,0001 / M (-1) s (-1) y una tasa de disociación de 0,00020 ± 0,00005 s (-1) a 37 ° C. El conjunto complejo de elongación es de 6 veces más lento a 30 ° C y requiere de Mg (2 +) durante la preincubación. El complejo de elongación montado incorpora un nucleótido correcto, el GTP, a la cartilla con una K (d) de 275 ± 52 M y K (pol) de 18 ± 1 s (-1). La fidelidad de la polimerasa es 1 / 34, 000, 1 / 59, 000, 1 / 135, 000 misincorporation de la UTP, el ATP, y CTP contrario CMP en la plantilla, respectivamente. La fidelidad de la polimerasa DENV es comparable con la transcriptasa inversa del VIH y la polimerasa del virus de la polio. Este trabajo se presenta la primera descripción de la cinética presteady de estado y la fidelidad de una polimerasa de ARN dependiente de ARN de la familia Flaviviridae.

Tomado de: J Biol Chem. 2011 Jan 21;286(3):2067-77. Epub 2010 Nov 15. Characterization of the elongation complex of dengue virus RNA polymerase: assembly, kinetics of nucleotide incorporation, and fidelity.Jin Z, Deval J, Johnson KA, Swinney DC.Virology DTA, Roche Palo Alto LLC, Palo Alto, California 94034, USA.
Nota : la investigación básica es la base de la investigación aplicada