Resumen (provisional)
Streptococcus pneumoniae expresa tres sialidasas distintas, Nana, NANB
y NANC, que se cree que son factores clave de virulencia y, por tanto, los
posibles objetivos farmacológicos importantes. Hemos informado anteriormente de
que las tres enzimas liberar productos diferentes de sialosides, pero podrían
compartir un mecanismo catalítico común antes de la etapa final de la formación
de producto. Sin embargo, las investigaciones cinéticas de los tres sialidasas
no han sido sistemáticamente hecho hasta ahora, debido a la falta de una
medición fácil y constante de velocidad de reacción sialidasa.
Resultados
En este trabajo, se presenta una
mayor caracterización cinética de sialidasas neumocócicas mediante el uso de un
método espectrofotométrico directo con el sustrato cromogénico
p-nitrofenil-N-acetilneuramínico (p-NP-Neu5Ac). Utilizando el ensayo, los parámetros
medidos cinéticos de la sialidasa tres purificado neumocócica, Nana, NANB y
NANC, se obtuvieron y se encontraban en perfecto acuerdo con los datos
publicados anteriormente. La principal ventaja de este método alternativo
reside en la medición directa de producto liberada, permitiendo de determinar
fácilmente las velocidades de reacción iniciales y registro completo cursos de
tiempo de hidrólisis.
Conclusión
Hemos desarrollado un método
espectrofotométrico preciso, rápido y sensible para investigar la cinética de
las reacciones catalizadas por sialidasa. Este método rápido, sensible, barata
y precisa podrían beneficiarse del estudio de la cinética y la inhibición de
sialidasas en general
Enviado por BMC
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Tomado de:
Optimization of a
direct spectrophotometric method to investigate the kinetics and inhibition of
sialidases
Jasvinder Kaur Hayre,
Guogang Xu, Luisa Borgianni, Garry L Taylor, Peter W Andrew, Jean-Denis
Docquier and Marco R Oggioni
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Citations
BMC Biochemistry 2012,
13:19 doi:10.1186/1471-2091-13-19
Published: 2 October
2012
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